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Ingredientes do Ágar Chocolate: Meio de Cultura Microbiológico Especializado

O Que é Ágar Chocolate?

Meio de cultura bacteriológico enriquecido, não seletivo, usado para isolamento de microrganismos fastidiosos (exigentes nutricionalmente), especialmente Haemophilus spp., Neisseria spp., Streptococcus pneumoniae e outros. Nome deriva da cor marrom-chocolate obtida pela lise térmica de hemácias.

Composição e Preparo

  1. Base: Ágar sangue (agar base + 5% sangue de carneiro/coelho estéril, desfibrinado).
  2. Lise Térmica: Aquecimento a 80-90°C por 10-15 min → hemólise completa → liberação de heme (fator X), NAD/NADP (fator V), proteínas, enzimas → cor marrom escuro característica.
  3. Resfriamento: 45-50°C → adição de suplementos opcionais (antibióticos para seletividade, ex: bacitracina, vancomicina, clindamicina) → placas.

    4. Ingredientes Típicos (Por Litro)

    • Ágar base (ex: Tripticase Soy Agar, Columbia Agar, GC Agar): 40-45 g
    • Sangue de carneiro/coelho desfibrinado estéril: 50 mL (5%)
    • Suplementos opcionais (pós-lise):
      — Fator V (NAD) e Fator X (heme) concentrados (para Haemophilus)
      — Antibióticos seletivos (conforme protocolo)
      — Vitamina K1 (para anaeróbios)

    Princípio Nutricional

    Lise das hemácias libera:

    • Heme (Fator X): essencial para citocromos de Haemophilus (não sintetizam).
    • NAD/NADP (Fator V): coenzima redox, requerida por Haemophilus e alguns Neisseria.
    • Proteínas, peptídeos, vitaminas, minerais: nutrição geral rica.
    A lise também inibe inibidores naturais do sangue (ex: anticorpos, complemento).

    Indicações Principais

    • Isolamento de Haemophilus influenzae (incluindo tipo b), H. parainfluenzae, H. ducreyi.
    • Isolamento de Neisseria gonorrhoeae, N. meningitidis (geralmente com suplementos seletivos: VCAT/VCN).
    • Streptococcus pneumoniae (α-hemólise, sensível à optoquina, solubilizável em bile).
    • Outros fastidiosos: Moraxella catarrhalis, Kingella kingae, Pasteurella spp., Actinobacillus spp.
    • Cultura de amostras estéreis (LCR, sangue, articulação, abscesso) onde fastidiosos suspeitos.

    Controle de Qualidade (CLSI / EUCAST)

    • Estirpes controle: H. influenzae ATCC 49247 (crescimento + fatores X/V), S. pneumoniae ATCC 49619 (α-hemólise), N. gonorrhoeae ATCC 49226 (crescimento + colônias típicas).
    • Verificar: hemólise completa (sem halos verdes), cor uniforme marrom, pH 7,2-7,4, esterilidade, performance de crescimento.
    • Validade: 2-4 semanas a 2-8°C (embalado para evitar desidratação).

    Diferença Chave: Ágar Sangue vs. Ágar Chocolate

    Nota Importante

    Ágar chocolate NÃO é comestível. É meio de cultura laboratorial. O nome "chocolate" refere-se apenas à cor. Não contém cacau, açúcar, leite ou ingredientes alimentícios.

    Nutrição

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    CaracterísticaÁgar Sangue (5% sangue não lisado)Ágar Chocolate (sangue lisado termicamente)
    CorVermelho vivoMarrom chocolate
    Fatores V e XIntracelulares (indisponíveis)Liberados (disponíveis)
    Crescimento HaemophilusNão cresce (satelitismo ao redor de Staph)Cresce bem (fatores livres)
    Hemólise visívelSim (α, β, γ)Não (sangue já lisado)
    Uso principalTriagem geral, hemólise, Strep, StaphFastidiosos (Haemophilus, Neisseria, pneumococo)