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Identificação de Bactérias na Microbiologia

Introdução

Desde a descoberta dos microorganismos há alguns séculos, cientistas buscam melhores formas de identificar bactérias. Alguns métodos são antigos e consagrados, enquanto outros são novos e baseados em genética. De qualquer forma, um fluxo de trabalho muito específico é necessário para identificar bactérias.

Exame Microscópico

O exame microscópico geralmente é feito pelo procedimento de coloração de Gram. Este método de coloração diferencia bactérias Gram-positivas (roxas) de Gram-negativas (rosadas), baseando-se na composição da parede celular do organismo. Bactérias Gram-positivas comuns são estafilococos e estreptococos. Bactérias Gram-negativas incluem E. coli e Klebsiella.
Além disso, a morfologia microscópica útil na identificação pode ser observada: por exemplo, estafilococos são cocos Gram-positivos em aglomerados. A coloração de Gram aparece microscopicamente como esferas roxas em formação semelhante a um cacho de uvas.

Seleção de Meios de Cultura

Com base na fonte da amostra (urina, sangue, etc.) e nos organismos prováveis que estariam presentes, selecionam-se os meios bacteriológicos apropriados para cultivar o organismo para análise posterior. Além disso, a seleção da temperatura e condições atmosféricas adequadas (aeróbicas versus anaeróbicas) permitirá o crescimento bacteriano.

Morfologia de Colônias

A aparência da colônia bacteriana em meios de crescimento bacteriológico oferece características-chave sobre a bactéria. Características como tamanho, cor, odor e a capacidade de lisar (romper) células sanguíneas são critérios importantes de identificação para determinar qual é a bactéria desconhecida.

Testes Bioquímicos e Enzimáticos

A capacidade de uma espécie bacteriana de utilizar um bioquímico, um açúcar, aminoácido ou substrato enzimático é muito útil na identificação. Esses testes podem ser usados individualmente (coagulase para Staphylococcus aureus) para identificar um organismo, ou em bateria de testes para identificar bacilos Gram-negativos. Muitos kits de testes comercialmente preparados estão disponíveis para identificar bactérias usando bioquímicos e enzimas.

Métodos Sorológicos

Métodos sorológicos para identificar bactérias são frequentemente usados em laboratório. Isso tipicamente envolve testar um anticorpo desconhecido contra um antígeno conhecido ligado a uma partícula de látex ou estrutura semelhante. Após misturar os dois e agitar, uma aglutinação visível (aglomeração) aparecerá se positivo para o organismo testado. Outros testes buscam neutralização de anticorpos, inibição e outros produtos finais.

Métodos Moleculares

Os métodos mais recentes e específicos disponíveis em laboratório são os métodos moleculares. Estes testes baseiam-se na capacidade de detectar, identificar e caracterizar microorganismos com base em seu DNA ou RNA. A reação em cadeia da polimerase (PCR) é um método molecular comum usado para identificar bactérias.