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Testes Laboratoriais para Identificação de Bactérias

Visão Geral

Bactérias estão entre os organismos mais numerosos e diversos do planeta. A bacteriologia determinativa emprega testes nutricionais e bioquímicos para identificação. Métodos tradicionais exigem tempo para cultura e isolamento, mas avanços tecnológicos permitem detecção rápida.

Principais Métodos de Identificação

1. Coloração (Staining)

• Gram: Passo inicial padrão. Usa corante, descolorante e contra-corante. Classifica bactérias pela parede celular: Gram-positivas (roxas) e Gram-negativas (rosas/vermelhas)
• Outras: Ziehl-Neelsen (ácido-álcool resistentes), coloração de esporos, coloração negativa

2. Morfologia Celular

Ao microscópio, bactérias são categorizadas pela forma:

• Bacilos: bastonetes (ex: E. coli)
• Cocos: esféricas (ex: Staphylococcus, Streptococcus)
• Espirilos, vibriões, filamentosas

3. Cultura em Meios Seletivos (Ágar Nutritivo)

Bactérias crescem em múltiplos pratos de ágar com nutrientes variados. Permitem segregação por:

• Requisitos nutricionais para crescimento
• Morfologia de colônia (cor, forma, bordas, hemólise)
• Substâncias inibidoras de crescimento

4. Testes Bioquímicos

Reações a substâncias específicas auxiliam identificação:

• Catalase: Adiciona H₂O₂; bolhas de O₂ indicam enzima catalase (Staph +, Strep -)
• Oxidase, urease, coagulase, fermentação de carboidratos, indol, citrato, etc.

5. Testes Sorológicos

Anticorpos detectam proteínas específicas na bactéria:

• Aglutinação
• ELISA (ensaio imunoenzimático)
• Western Blot

6. Métodos Moleculares (DNA/RNA)

Identificação por marcadores genéticos no genoma bacteriano:

• PCR (reação em cadeia da polimerase)
• Sequenciamento do gene 16S rRNA
• Microarrays e NGS (sequenciamento de nova geração)

Permitem identificação muito mais rápida, automação e detecção de bactérias não cultiváveis.

Fluxo Diagnóstico Típico

Coloração de Gram → Cultura em meios seletivos → Testes bioquímicos automatizados (ex: VITEK, Phoenix) → Confirmação por PCR/sequenciamento se necessário.