Efeitos das Sementes de Pinus pinaster e Pinus koraiensis

Pinus pinaster e Pinus koraiensis são coníferas nativas do Mediterrâneo. Agulhas grossas, cones com escamas lenhosas rígidas. Sementes populares como condimentos. Óleo extraído também pode ser incluído na dieta. Importante entender metabolismo dos óleos antes de consumir. Saiba como afetam colesterol e triglicerídeos, influenciando risco de condições crônicas (doença cardíaca, AVC). Observar efeitos em modelos animais pode ser boa forma de entender.

Materiais Necessários

• Ratos Wistar machos, 50 dias, 200g
• Kit teste colesterol e triglicerídeos
• Centrífuga
• Solução fosfato tamponada (PBS)
• Azida de sódio

Instruções

1. Aclimate ratos a 20°C e escuridão 20h-8h. Ruído mínimo, acesso a água/ração regular. Reduz estresse que afetaria lipídios/glicose sanguíneos.

2. Coleta amostra de sangue de cada rato; teste colesterol/triglicerídeos para nível basal.

3. Divida ratos em 2 grupos. Grupo 1: dieta com 5% óleos de sementes de Pinus pinaster e Pinus koraiensis por 28 dias. Grupo controle: 5% ácido oleico mesmo período.

4. Novas amostras de sangue de ambos grupos. Separe plasma centrifugando 630 rpm por 20 min a 4°C. Divida plasma em duas porções. Use uma para testar triglicerídeos/colesterol.

5. Outra porção para cromatografia gasosa de filtração (separa moléculas por tamanho). Misture 200µL plasma com buffer e azida de sódio; passe por leito poroso de esferas para separar moléculas de gordura no plasma. Confirma resultados do teste sanguíneo anterior.