A solução de Benedict contém sulfato de cobre(II) (CuSO₄), citrato de sódio (complexante) e carbonato de sódio (tampão alcalino). Em meio alcalino aquecido, açúcares redutores (com grupo aldeído livre na forma linear) reduzem Cu²⁺ (azul) a Cu⁺ (óxido de cobre(I), laranja-tijolo precipitado). O açúcar é oxidado a ácido carboxílico.
Monossacarídeos (glicose, frutose, galactose, ribose) e alguns dissacarídeos com ligação glicosídica livre (maltose, lactose, celobiose). Sacarose (açúcar de mesa) NÃO é redutor (ligação α1-β2 bloqueia grupos anoméricos). Amido/glicogênio também não (polímeros).
| Cor / Aspecto | Glicose aprox. (mg/dL) | Interpretação |
|---|---|---|
| Azul (inalterado) | 0 | Negativo |
| Verde | ~100-500 | Traços / + |
| Amarelo-esverdeado | ~500-1000 | + |
| Laranja | ~1000-2000 | ++ |
| Vermelho-tijolo / Laranja-escuro | >2000 | +++ / ++++ |
Verde lamacento = concentração muito baixa (poucos íons Cu²⁺ reduzidos).
Glicosúria (glicose na urina) ocorre quando glicemia > limiar renal (~180 mg/dL). Teste de Benedict na urina foi triagem histórica. Hoje: glicemia capilar, HbA1c, glicemia de jejum/POG. Ainda usado em ensino, laboratórios de baixo recurso, análise de alimentos/bebidas.
Stanley Benedict (1884-1936), químico americano, aprimorou o reagente de Fehling (instável, duas soluções) criando versão estável, de frasco único, em 1908. Revolucionou diagnóstico bioquímico na 1ª metade do séc. XX.