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Teste de Anticorpo Direto Fluorescente (DFA) para Peste: Método Diagnóstico Rápido

Teste DFA para Detecção de Yersinia pestis

O teste de Anticorpo Direto Fluorescente (DFA) é o método diagnóstico presuntivo mais rápido para peste, fornecendo resultados em 1–2 horas após o recebimento da amostra.

Princípio

• Anticorpos monoclonais marcados com fluoresceína específicos para o antígeno Fração 1 (F1) de Y. pestis.
• Aplicado a frotis de:
  • Aspirato de linfonodo (bubo)
  Expectorado / lavagem brônquica (peste pulmonar)
  • Isolado de hemocultura
  • Tecidos de animais falecidos (roedores, etc.)
• Incubar, lavar, montar; examinar em microscopia de fluorescência (fluorescência verde-maçã em cocobacilos).

Características de Desempenho

• Sensibilidade: 80–95% (depende da amostra).
• Especificidade: >95% com anticorpos específicos para F1.
• Tempo de resposta: <1 hora para preparação do frotis + coloração.
• Limitações: Não distingue organismos viáveis vs. mortos; não pode determinar suscetibilidade antimicrobiana.

Algoritmo Diagnóstico (CDC/OMS)

1. Presuntivo: DFA positivo + compatibilidade clínica/epidemiológica → iniciar tratamento + notificação de saúde pública.
2. Confirmatório: Cultura (48–72h), PCR (gene F1, gene pla), sorologia (aguda/convalescente).
3. Confirmação em Laboratório de Referência: Necessária para classificação definitiva do caso.

Manipulação de Amostras

• Transporte a 4°C (cadeia de frio); não congelar.
• Processar em BSL-2 com práticas BSL-3; Y. pestis é agente selecionado de Nível 1.
• Notifique o laboratório imediatamente para processamento prioritário.

Contexto Clínico

• Áreas endêmicas: Sudoeste dos EUA (AZ, CO, NM, UT), África, Ásia, América do Sul.
• Fatores de risco: exposição a roedores, picadas de pulgas, manuseio de animais doentes, viagens.
• Terapia empírica (estreptomicina, gentamicina, doxiciclina, ciprofloxacina) não deve aguardar o resultado do DFA se a suspeita clínica for alta.

O DFA permite uma resposta rápida de saúde pública — isolamento, rastreamento de contatos, investigação ambiental — enquanto os testes confirmatórios prosseguem.