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Por Que Álcool Frio é Usado em Testes de DNA

Álcool frio é usado para separar o DNA de soluções à base de água. Isso permite que o DNA seja purificado para testes genéticos subsequentes. Adicionar álcool a uma solução contendo DNA é uma maneira simples de obter o DNA puro necessário, e temperaturas mais frias retardam enzimas que podem degradar o DNA, proporcionando melhores resultados de extração.

Quebrar Paredes Celulares

Procedimentos de extração para obter DNA puro precisam se livrar de todos os componentes moleculares e químicos do tecido do qual o DNA está sendo extraído. Os primeiros passos envolvem lisar ou destruir as paredes celulares. Isso pode ser feito com uma variedade de agentes químicos que são cáusticos para membranas celulares, mas não prejudicam o DNA. As células também podem ser sonicadas, homogeneizadas ou trituradas para destruir membranas.

Removendo Lipídios

Uma vez que as paredes celulares tenham sido destruídas, um detergente é adicionado para se livrar das gorduras e óleos que compõem as membranas celulares. Detergentes fazem com que as gorduras e óleos se dissolvam na solução.

Remover Proteínas

Proteínas e enzimas podem ser digeridas adicionando uma protease à solução. Proteases quebram proteínas em pequenos peptídeos e aminoácidos.

Precipitar DNA

Adicionar álcool frio a uma solução fará com que o DNA precipite e agregue. O DNA pode ser coletado centrifugando a amostra e despejando a camada líquida. O DNA deve existir como um pequeno pellet no fundo do tubo de centrífuga.

Purificar DNA

O DNA pode ser lavado ressuspendendo-o em uma solução de álcool frio e re-centrifugando-o várias vezes para obter uma amostra de DNA muito pura. Álcoois típicos usados para precipitar DNA incluem etanol e isopropanol. Este processo deixa uma amostra muito pura para testes rigorosos de DNA.