Visualizando Bactériofagos: Microscopia e Técnicas de Exibição

Bactériofagos (fagos) têm 20–200 nm — abaixo da resolução da microscopia de luz. Visualização requer:

1. Microscopia Eletrônica (EM)

• TEM: Estrutura interna, simetria do capsídeo, morfologia da cauda. Padrão-ouro.
• SEM: Topologia de superfície 3D.
• Crio-EM: Resolução quase atômica sem coloração; Nobel 2017.

2. Melhorias de Microscopia de Luz

• Fluorescência: Fago marcado com corantes/proteínas fluorescentes (ex., capsídeo fundido a GFP). Imagem ao vivo possível.
• Campo escuro / Contraste de fase: Melhora contraste para partículas não marcadas; resolução limitada.

3. Exibição de Fago

• Biblioteca de peptídeo/proteína fundida à proteína de revestimento (pIII/pVIII) → link fenótipo-genótipo.
• Usado para: Mapeamento de epítopo, descoberta de ligante, engenharia de anticorpos, evolução dirigida.

4. Coloração Negativa (Preparo TEM)

• Acetato de uranila / ácido fosfotúngstico → metal pesado envolve o fago → alto contraste.
• Rápido, rotineiro para verificação morfológica.

A escolha do método depende da questão: estrutura (crio-EM), dinâmica (fluorescência), ligação (exibição de fago).