Ellman Assay Protocolo

ensaio Ellman torna possível monitorar a inibição da colinesterase no sangue , uma molécula que inicia a quebra de hormônios como a acetilcolina. Por conseguinte , permite a identificação de exposição de uma pessoa a certos pesticidas . Vantagens

Quando utilizado em combinação com a medição de excreções de metabólitos urinários , método de reagente de Ellman fornece laboratórios com uma maneira rápida e fácil de provar que um assunto selecionado tenha ou não tenha sido exposto a pesticidas organophorous .

Uma única gota de sangue é tudo o que é necessário. Desempenho do ensaio de Ellman não requer a disponibilidade de um grande centrifugador éter . Realizar este ensaio requer apenas um instrumento que tem a capacidade de detectar as ondas de luz .
Método

Brasão do poço de uma placa de microtitulação com o ensaio de toda a mistura importante, que contém acetiltiocolina ( AChE ) . Após cada poço ter sido revestido , em seguida, uma quantidade de micro de sangue de um sujeito pode ser colocado em cada poço . Quando isso tiver sido concluída, em seguida, você adicionar uma substância que identifica a proteína de interesse e atribui a essa proteína.

O reagente que é adicionado apenas antes da medição das ondas de luz emitidos é aquele que deve emitir luz ondas que têm um comprimento de 405 nm . A máquina utilizada no laboratório mede a quantidade de luz absorvida nesse comprimento de onda .

Precauções

O cromogênicos ( coloração ) de reagentes utilizados durante a realização deste teste tem sido mostrado para alterar o comprimento das ondas de luz emitidos quando ele é exposto a temperaturas mais altas . Por isso, manter esse reagente refrigerado.