Por Que o ELISA é Tão Sensível? Anticorpos, Contaminação e Tempos de Incubação

O Ensaio de Imunoabsorção Enzimático (ELISA) determina concentrações de substâncias em amostra, desde interleucinas (químicos do sistema imune), proteínas, anticorpos (como para HIV ou outras doenças). ELISA é confiável e preciso, por isso investigadores usam em laboratórios de pesquisa e testes em pacientes. Sua sensibilidade o torna ferramenta comum favorecida.

Sensibilidade dos Anticorpos

ELISA é sensível porque usa anticorpos para detecção. Ao contrário de algumas moléculas de fármacos que alvejam várias células e químicos fora do alvo principal (fármacos "sujos"), anticorpos são como cães de caça com olfato ainda maior. Só se fixam em alvo específico. Se pessoa tenta detectar anticorpos HIV em amostra de sangue, anticorpos de detecção ELISA se fixam especificamente neles. Estruturas moleculares similares geralmente não os enganam.

Contaminação

ELISA também é sensível a contaminação porque se amostras forem misturadas minimamente (ex: mesma ponta de pipeta para poços diferentes), teste detecta contaminação e dá falso positivo para amostra supostamente negativa. Contaminação também ocorre quando outros reagentes, como tampões de lavagem ou revestimento, acidentalmente recebem amostra em suas soluções.

Tempos de Incubação

Outra razão da sensibilidade é baseada na incubação. Dependendo do protocolo, período permite tempo para anticorpos e amostra aderirem e fixarem nos poços. Se técnico apressa ou pula esta etapa, quantidade de amostra fixada pode diminuir, permitindo amostra não fixada ser descartada nas lavagens. Nesta situação, técnico pode não obter leitura precisa da amostra.