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Preparação de Lâmina de Sangue: Por que a Água Estéril Falha e Soluções de Coloração São Essenciais
Água estéril não pode ser usada para preparar lâminas de sangue para microscopia. Ela não possui as propriedades fisicoquímicas para preservar a morfologia celular ou permitir a coloração.
Por que a Água Falha
- Lise Osmótica: Hipotônica → hemácias incham e estouram (hemólise); leucócitos se deformam.
- Sem Fixação: Proteínas coagulam mal; células são lavadas da lâmina.
- Sem Afinidade de Coloração: Colorações Romanowsky (Wright-Giemsa, Diff-Quik) requerem fixação com metanol e pH bufferizado (6,8–7,2) para formação do complexo eosina/azure.
Procedimento Correto
- Lâmina: Limpa, livre de gordura.
- Gota: Pequena gota de sangue (fresco, anticoagulado ou capilar).
- Espalhamento: Lâmina espalhadora em 30–45° → borda penacho monocamada.
- Secagem ao Ar: Rápida, completa (crítica).
- Fixação: Metanol absoluto, 1–3 min (ou metanol na coloração).
- Coloração: Tipo Romanowsky (Giemsa, Wright, Leishman) conforme protocolo.
- Enxágue/Secagem: Água bufferizada/pH 6,8 buffer; drenagem vertical.
Principais Buffers
Buffer fosfato (pH 6,8–7,2) mantém a solubilidade da coloração e a carga celular para coloração diferencial (basofílica vs. acidofílica).
A água sozinha destrói o espécime. A técnica adequada garante lâminas de qualidade diagnóstica para hemograma diferencial, malária, parasitas, morfologia.