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Como Cultivar e Contar Organismos em Laboratório de Microbiologia

Laboratório de microbiologia recebe amostras de fontes humanas e ambientais e identifica bactérias na amostra. Técnicos fazem isso dando às bactérias ambiente adequado para crescer. Uma vez crescidas, bactérias são contadas e identificadas. Isso ajuda cientistas e médicos a saber quais bactérias estão na amostra e quantas, ambos essenciais para saber como lidar com os organismos.

Materiais Necessários

• Amostra bacteriana
• Placas de Petri com meio de cultura
• Frasco com meio de cultura
• Alças de inoculação
• Calculadora
• Equipamento de proteção individual
• Capela de segurança biológica

Instruções

Inoculação

1. Faça estrias na placa de Petri com swab da amostra de lado a lado em metade da placa. Se amostra for urina, pegue gota de urina e use alça de inoculação para estriar placa de lado a lado em metade da placa. Se amostra for sangue, coloque sangue no frasco com meio.
2. Use alça de inoculação diferente para estriar segunda metade da placa de lado a lado, começando na metade inicialmente inoculada. Isso carrega bactérias inicialmente colocadas e leva pequeno número para a outra metade.
3. Coloque placas inoculadas ou frascos com meio na incubadora a 37°C pelo tempo especificado no procedimento operacional padrão do laboratório.

Contagem de Colônias

4. Retire placas da incubadora e coloque sob capela de segurança biológica. Se amostra foi sangue, retire frascos da incubadora e estrie placas de maneira similar a outras amostras e incuba estas placas.
5. Conte número de colônias individuais crescendo na placa. Se inoculação feita corretamente, colônias devem estar distantes o suficiente para contagem individual. Se colônias sobrepostas, pode precisar re-inocular novas placas.
6. Use calculadora para multiplicar número de colônias contadas vezes volume da amostra (no caso de amostras líquidas). Isso dará número de unidades formadoras de colônia (UFC) por mililitro de amostra, conhecido como contagem UFC. Se amostra não era líquida, apenas número de UFCs por si é relevante.