Teste de Anticorpo Antinuclear (ANA): Procedimento, Padrões e Utilidade Clínica

O teste de Anticorpo Antinuclear (ANA) detecta autoanticorpos direcionados a componentes nucleares. É um teste de rastreio para doenças autoimunes sistêmicas, especialmente lúpus eritematoso sistêmico (LES).

Procedimento do Teste (Imunofluorescência Indireta - IIF)

1. Coleta de sangue: punção venosa em tubo separador de soro (SST) ou tubo de tampão vermelho. Não é necessário jejum.
2. Separação do soro: centrífuga → coleta do soro.
3. Preparação do substrato: células HEp-2 (linha de carcinoma epitelial humano) fixadas em lâminas—expressam >100 antígenos nucleares/citoplasmáticos. (Historicamente: seções de fígado/rímel de roedor.)
4. Incubação do soro: soro do paciente (diluído, tipicamente 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, 1:640, 1:1280) aplicado nas lâminas. Incubar 30 min à temperatura ambiente.
5. Lavagem: remoção de anticorpos não ligados.
6. Detecção: adicionar anti-humano IgG (ou IgG/IgM/IgA) marcado com fluoresceína. Incubar, lavar.
7. Visualização: microscópio de fluorescência. Padrões: homogêneo, pontuado, nucleolar, centrômero, membrana nuclear, citoplasmático.
8. Interpretação: título = maior diluição com fluorescência visível. O padrão sugere autoanticorpos específicos (ex.: homogêneo → anti-DNA duplo-filamento, cromatina; pontuado → anti-Sm, RNP, SSA/Ro, SSB/La; centrômero → anti-centrômero; nucleolar → anti-Scl-70, RNA Pol I/III).

Utilidade Clínica

• LES: ~95% sensível; título ≥1:160 + critérios clínicos apoia o diagnóstico.
• Outras doenças: síndrome de Sjögren, esclerodermia, polimiosite/deratomiosite, MCTD, hepatite autoimune, lúpus induzido por drogas.
• Falsos positivos: indivíduos saudáveis (até 15% a 1:40, 5% a 1:160), infecções, medicamentos, envelhecimento.

Acompanhamento

ANA positivo → painel de autoanticorpos específicos (EIA, multiplex, line blot) para anti-DNA duplo-filamento, Sm, RNP, SSA, SSB, Scl-70, centrômero, Jo-1, etc.

ANA é uma ferramenta de rastreio, não diagnóstica por si só. A correlação clínica é obrigatória.