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Teste de Molisch: Princípio, Procedimento e Interpretação para Detecção de Carboidratos

O teste de Molisch é um teste qualitativo geral e sensível para carboidratos (mono-, di-, polissacarídeos, glicoproteínas).

Princípio Químico

1. Desidratação: H₂SO₄ concentrado remove H₂O do carboidrato → furfural (pentoses) ou 5-hidroximetilfurfural (hexoses).
2. Condensação: Derivados de furfural reagem com α-naftol (1% em etanol) → produto cíclico roxo/violeta (cromógeno de Molisch) na interface líquida.

Procedimento

1. 2 mL da solução de teste (ou suspensão) em um tubo de ensaio limpo.
2. Adicione 2–3 gotas da solução de α-naftol; misture suavemente.
3. Incline o tubo; despeje lentamente 1–2 mL de H₂SO₄ concentrado pela lateral para formar uma camada inferior distinta. Não misture.
4. Observe a interface imediatamente.

Interpretação

• Positivo: Anel roxo/violeta na junção em segundos. Intensidade ∝ concentração de carboidrato.
• Negativo: Nenhuma mudança de cor (ou apenas amarelo/marrom por carbonização).

Sensibilidade e Limitações

• Detecta ~1–5 µg de carboidrato.
• Falsos positivos: Alguns não carboidratos (glicerol, ácido lático, certos aminoácidos) dão cor fraca.
• Não distingue o tipo de carboidrato; siga com testes específicos (Benedict, Barfoed, Seliwanoff, Bial, iodo).
• Risco do H₂SO₄ concentrado: corrosivo, exotérmico; use EPI, adicione ácido ao tubo (não água ao ácido).

Aplicações

Rastreio de carboidratos em amostras desconhecidas, análise de alimentos, frações bioquímicas, extratos vegetais.