Como calibrar um HPLC

HPLC é um teste de cromatografia líquida de alto desempenho que obriga solventes através de uma coluna sob altas pressões de até 400 atmosferas. A alta pressão faz com que este ensaio de cromatografia efectuar mais rapidamente do que outros testes de cromatografia com métodos de detecção de HPLC automatizada e sensível . A fim de realizar por HPLC , de uma série de padrões de calibração que contêm os compostos específicos em que a que está a testar necessidade de ser preparado usando uma curva de calibração . Coisas que você precisa
coluna HPLC
Amostras
água HPLC
Normas para amostras
balões volumétricos
Microsoft Word ou Excel
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Prepara-se uma série de diluições para preparar os padrões de calibração contendo os compostos a serem analisados . Faça as normas variam de 20 microgramas por mililitro de 100 microgramas por mililitro usando balões volumétricos . Use HPLC água para suas diluições. Se você está analisando a cafeína , por exemplo, você deseja obter um padrão de cafeína e diluir isso para criar uma curva padrão.
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Prepare a sua amostra que deseja analisar no HPLC. Por exemplo, se você quer analisar a cafeína , você pode escolher o chá ou o café.
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diluir a amostra com HPLC água para que fique na faixa de suas amostras.

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Injectar as amostras na coluna de HPLC . Siga as instruções específicas fornecidas pelo fabricante para a sua coluna particular.
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Faça um gráfico dos dados obtidos para as soluções padrão com área do pico versus a concentração da amostra .
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Determinar a concentração de cada componente presente em sua amostra a partir da curva padrão que você criou.