Como Analisar Citometria de Fluxo de Dados

A citometria de fluxo é o processo de análise e contagem de células e partículas utilizando a teoria de espalhamento de luz e luz de excitação . As células são forçadas através de uma bainha de um de cada vez e passar através do feixe de laser . O laser excita as substâncias químicas no interior das células . Diferentes tipos de células emitem diferentes tipos de luz . Os detectores ópticos ou lentes de pegar e medir a luz , transferindo a luz para um fluxo de dados . Ao analisar os dados , os técnicos podem descobrir a distribuição das células e ajudar os pesquisadores do médico e tomar decisões sobre o tratamento. Instruções
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Configure os parâmetros do citômetro . Cada citómetro tem um componente de computador que aceita a luz emitida a partir das células e converte a quantidade e qualidade da luz para os dados acessíveis . Uma vez que existem diferentes tipos de células , há uma grande quantidade de dados criada . Definir os parâmetros dos dados necessários retarda o fluxo de informações a um nível administrável . Algumas opções incluem a configuração do nível de tensão , ajustando os parâmetros de pulso de laser ou a definição do limite da luz.
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Escolha os filtros em cada lente óptica. Filtros que cortar a largura de banda específica para cada lente permitem que o citômetro de reconhecer as diferentes propriedades químicas de cada célula. Ele também permite que o citômetro de reconhecer se a luz é refletida para a frente, como uma dispersão para a frente ( FS ) ou se ela é refletida em um ângulo de 90 graus em uma dispersão lateral ( ss. )
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Escolha a aquisição logarítmica ou linear. Aquisição linear é que os dados em bruto , que é gerada pelo citómetro . Ela mostra o tipo de célula , ou a composição química das células que fluem através do feixe de laser . A função logarítmica vai um passo além . Ele usa uma função matemática para projetar células adicionais que podem não ser detectáveis pelo citômetro . Por exemplo , as células podem mostrar um composto químico que é um sub-produto de uma infecção viral . Embora o vírus pode ser muito pequeno para ser detectado pela corrente de luz , a função logarítmica será a hipótese de a presença do vírus com base na composição química das células .
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Seleccione um ou dois parâmetros histogramas . Estes são tipos de gráficos utilizados para mostrar os dados coletados pelo citômetro . Um histograma é um parâmetro adequado , se os dados são todos colocados num eixo " positivo " , o que significa que toda a luz é reflectida e medida . Uma maneira fácil de pensar nisso é imaginar um gráfico de barras , com níveis à esquerda e à parte inferior do quadro . A informação é traçada entre estes dois parâmetros . Mas para as células que absorvem diferentes quantidades de luz , um parâmetro de dois histograma é usado . Isso permite que os dados a serem plotados em um eixo , tanto positivas como negativas.