Protocolos de Permeabilização

Protocolos de permeabilização estão relacionados ao processo de tornar membranas celulares permeáveis usando substâncias químicas para acessar o interior da célula sem destruí-la. Estes protocolos são principalmente usados durante o estudo e análise dos componentes e metabolismo molecular de células de mamíferos e microrganismos como bactérias.

Permeabilização de Bactérias com Hexano

Este protocolo é usado nas análises da enzima L-asparaginase, encontrada em certas bactérias como Escherichia coli, Enterobacter aerogenes e Pseudomonas aeruginosa. Segundo o Protocol Online, este método usa um solvente hexano (C6H14) em solução aquosa de sal para a liberação da enzima. Hexanos são obtidos através do refino de petróleo bruto, têm baixa toxicidade e são considerados uma das soluções mais custo-efetivas usadas hoje em protocolos de permeabilização.

Introdução de Peptídeos em Miócitos Cardíacos

Segundo artigo publicado no "Circulation Research" da Associação Americana do Coração, moléculas chamadas saponinas podem ser usadas na permeabilização de membranas de células de mamíferos. Este procedimento é usado durante experimentos envolvendo a introdução de peptídeos — moléculas grandes e normalmente impermeáveis — em células cardíacas neonatais, chamadas miócitos. Este protocolo é usado para estudar enzimas PKC, envolvidas na regulação e taxa de contração em células cardíacas, entre outras funções.

Formaldeído e Detergente

O composto químico formaldeído, o detergente Triton X-100 e até 50% de álcool metílico (MeOH) são usados em um protocolo de permeabilização para estudar células sanguíneas, segundo artigo publicado no site do PubMed. Este método é normalmente usado para identificar moléculas chamadas fosfo-epítopos — encontradas em células sanguíneas, nervosas, de pele e outras — de outros componentes intracelulares por diferenciação de cor.