Como Calcular Diluições Seriais em Microbiologia: Exemplo Prático 10 mL de 2,5×10⁷ para 25 células/mL

Diluições seriais são usadas em laboratórios biológicos e químicos principalmente para fins experimentais. Frequentemente feitas de forma logarítmica ou por fatores de 10. Bactérias, células ou solutos são diluídos para atuar como controles em experimentos. Diluições servem como controle preciso em experimentos dose-resposta, pois todas amostras originam-se do mesmo lote. Além disso, diluições podem ser necessárias para reduzir número de partículas em amostra para uso em equipamentos automatizados. Fórmula geral: concentração original / fator de diluição = nova concentração. Exemplo: diluição serial de 10 mL de 2,5×10⁷ células/mL para 25 células/mL por fator de diluição 100.

Materiais Necessários

• Óculos de proteção
• Luvas
• 10 mL de 2,5×10⁷ células/mL
• Três tubos de ensaio de 100 mL
• Lápis de cera (para rotular)
• Pipeta de 1 mL
• Pipeta de 100 mL

Instruções

1. Coloque óculos de proteção e luvas antes de manipular substâncias.
2. Rotule os três tubos com lápis de cera: 2,5×10⁵, 2,5×10³, 25 células/mL.
3. Use a fórmula: concentração original / fator de diluição = nova concentração. Concentração original 2,5×10⁷, fator 100 → nova concentração 2,5×10⁵ células/mL.
4. Primeira diluição (1:100): Pipete 1 mL da solução original no tubo "2,5×10⁵". Adicione 99 mL de água para completar diluição a 2,5×10⁵ células/mL.
5. Segunda diluição (1:100): Pipete 1 mL do tubo "2,5×10⁵" no tubo "2,5×10³". Adicione 99 mL de água → 2,5×10³ células/mL.
6. Terceira diluição (1:100): Pipete 1 mL do tubo "2,5×10³" no tubo "25 células/mL". Adicione 99 mL de água → 25 células/mL final.