Como Testar a Inibição da Aglutinação em Látex de HCG

Originalmente, testes de gravidez envolviam injetar a urina de uma mulher supostamente grávida em uma coelha, camundongo ou rã. Após 24 a 48 horas, o animal era eutanasiado e os ovários inspecionados para evidência de folículos hemorrágicos indicando a presença de gonadotrofina coriônica humana (HCG) na urina. Mais tarde, um teste mais simples envolvendo esferas de látex revestidas de HCG e anti-soro de HCG simplificou o processo para um mínimo de quatro horas. Embora este método de teste para presença de HCG não seja mais usado, a ciência por trás do teste de aglutinação em látex para HCG pavimentou o caminho para o atual teste de gravidez baseado em corante.

O que você vai precisar

• Amostra de urina
• Tubo de ensaio
• Pipeta
• Centrífuga
• Kit de teste de gravidez por aglutinação em látex
• Banho-maria aquecido

Instruções

1. Obtenha uma amostra de urina da manhã cedo da paciente, preferencialmente a primeira urina do dia.

2. Comece o teste da amostra dentro de 12 horas. Após 12 horas, o HCG degrada e a amostra não fornece mais resultado confiável.

3. Centrifugue a amostra de urina a 3.000 rpm por três minutos.

4. Retire o sobrenadante, ou camada superior da amostra de urina, e combine com o anti-soro de HCG. As quantidades exatas de cada dependerão do kit usado. O anti-soro de HCG pode ser de coelho, humano ou camundongo.

5. Misture a urina e o anti-soro de HCG completamente.

6. Incube o tubo de ensaio contendo a amostra e anti-soro por uma hora em banho-maria a 37 graus Celsius, ou temperatura corporal. Durante a incubação, o anti-soro se ligará a qualquer HCG presente na amostra de urina.

7. Remova o tubo de ensaio do banho-maria e adicione a suspensão de látex revestida de HCG ao tubo de ensaio. Novamente, a quantidade dependerá do kit usado. Agite a suspensão completamente antes de retirar para garantir a retirada de uma quantidade exata.

8. Misture a amostra e a suspensão de látex completamente e incube novamente no banho-maria por duas horas.

9. Remova o tubo de ensaio do banho-maria.

10. Centrifugue o tubo de ensaio a 3.000 rpm por dois minutos.

11. Remova o tubo de ensaio da centrífuga e compare sua aparência ao controle positivo fornecido com o kit de teste. Um tubo de ensaio turvo significa grávida, e um tubo de ensaio claro significa não grávida.