OptiPrep Gradiente Preparação Protocolos

OptiPrep é o nome comercial para uma solução estéril de endotoxina de 60 por cento de iodixanol , um produto químico originalmente desenvolvido como um meio de contraste de raios - X . As endotoxinas são moléculas estruturais de bactérias, que podem ser reconhecidas pelo sistema imunológico do corpo . Laboratório norueguês Axis -Shield produz esta solução, que é amplamente utilizado na pesquisa biomédica , incluindo o tráfego de membrana celular de substâncias , bem como a genética de vírus e bactérias . Cloreto de sódio Protocolo

O OptiPrep sódio preparação propósito geral gradiente de cloreto usando cloreto de sódio como o balanceador osmótica , o que mantém a concentração da solução equilibrada . Técnicos fazer uma solução de iodixanol trabalho 50 por cento por diluição com um diluente OptiPrep padrão . Eles adicionar 0,85 por cento de cloro de sódio ou sacarose 0,25 molar e Tris - hidrochloride a pH 7,4, para a preparação de gradiente . De acordo com o eixo -Shield , macromoléculas , tradicionalmente, têm sido purificado em gradientes de concentração elevada de sacarose , o glicerol , os sais de metais alcalinos ou sais de metais pesados . OptiPrep oferece a alternativa para isolá-los em soluções menos concentradas.
Protocolo de Estudos HPV

HPV , ou vírus do papiloma humano , ataca as mucosas , causando verrugas genitais e úlceras que podem evoluir para tumores. O protocolo OptiPrep relaciona-se com o estudo do material genético do vírus , e inclui a preparação de gradiente de OptiPre . Técnicos preparar uma preparação de 46 por cento gradiente OptiPrep misturando 70 ml da OptiPrep , 10 ml de salina tamponada com fosfato ( PBS ) , 12,5 ml de cloro de sódio , 45 microlitros de cloreto de cálcio , 25 microlitros de cloreto de magnésio e de 210 microlitros de cloreto de potássio . A preparação deve ser protegido da luz e armazenar em temperatura ambiente por até dois meses.
Isolamento de células dendríticas Protocolo

As células dendríticas fazem parte do sistema imunitário dos mamíferos , muitas vezes presentes nos tecidos perto da pele e no revestimento interno de alguns órgãos , tais como o estômago e os intestinos . O protocolo de células dendríticas usa solução OptiPrep no processo de isolar essas células . Técnicos misturar OptiPrep em uma solução de cloreto de sódio e oito por cento , em tampão Tricina de pH 7,4 e ácido etilenodiaminotetracético ( EDTA ) . A preparação gradiente podem ser armazenados em até 39,2 graus Fahrenheit durante um mês.