Extrato de Fígado no Teste de Ames: Papel na Ativação Metabólica de Promutágenos

Propósito do Teste de Ames

O teste de Ames usa cepas de Salmonella typhimurium para detectar compostos mutagênicos. Muitos produtos químicos (promutágenos) requerem conversão metabólica para se tornarem mutagênicos.

Fração S9 de Fígado

• Preparada a partir de fígado de roedores induzido com Aroclor 1254 ou fenobarbital.
• Contém enzimas da Fase I (CYP450s, FMOs) e da Fase II (GST, UGT, SULT) mais cofatores (NADPH, UDPGA, PAPS, GSH).
• Imita o metabolismo hepático mamífero in vitro.

Como Funciona

1. Composto de teste + bactérias + mistura S9 + cofatores → incubação.
2. Enzimas convertem promutágeno → eletrófilo reativo.
3. O eletrófilo danifica o DNA bacteriano → colônias reversoras (his⁺).
4. Relação dose-resposta indica potência mutagênica.

Significância

Sem S9, apenas mutagênicos de ação direta são detectados. Com S9, o teste identifica compostos que requerem ativação metabólica (ex.: aflatoxina B1, benzo[a]pireno, 2-acetilaminofluoreno). É um padrão regulatório para triagem de genotoxicidade.