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Protocolo de Microssomos Hepáticos

Função do Fígado e Microssomos

Fígado tem papel maior na transformação de drogas no corpo. Microssomos são frações subcelulares de tecido hepático. Procedimentos específicos (protocolos) necessários para pesquisadores estudarem microssomos, enzimas e interações medicamentosas.

Protocolo Básico

Envolve adição de compostos a microssomos com e sem carreador de elétrons. Amostras coletadas em tempos predeterminados e centrifugadas. Resultados com e sem carreador comparados.

Variação na Centrifugação

Elementos principais do protocolo podem permanecer, mas variações em certas etapas melhoram resultados. Resultados comparados para revisar protocolo. Em um caso, força de centrifugação variada. Resultados indicaram que reduzindo força, pureza de microssomos aumentou.

Variação em Soluções Tampão

Células hepáticas geralmente diluídas com solução tampão em etapa chamada homogeneização. Via de pesquisa: presença/ausência de sacarose na solução. Resultados indicam que com sacarose, atividade redutase aumenta (estudos do Center for Human Toxicology, Dept. Farmacologia/Toxicologia, Univ. Utah). Redutase é enzima que catalisa reações orgânicas reduzindo energia de ativação necessária.

Variações na Homogeneização

Mistura de células com solução tampão feita agitando tubo manualmente. Quando 10 golpes usados em vez de 6 ou 8, atividade redutase aumenta.