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Processo de Extração para Análise de DNA

Introdução

O DNA, ácido que contém o projeto celular de um organismo vivo, pode indicar presença de indivíduo em cena de crime, identificar cadáver, determinar paternidade ou ajudar pesquisadores a entender plantas e animais. Para estudar DNA de organismo específico, o pesquisador deve extraí-lo dos tecidos desse organismo. Alguns passos básicos liberam o DNA da célula e o tornam visível para análise.

Lise Celular

Lise, primeira etapa, envolve romper paredes celulares para acessar proteínas internas. Métodos comuns: congelamento, liquefação, som de alta frequência, moagem manual ou com lâminas mecânicas. Todos abrem células, mas alguns geram calor, que pode desnaturar proteínas, exigindo manter amostras e ferramentas resfriadas.

Remoção de Lipídios

Após ruptura da membrana celular, detergente entra na célula e separa lipídios (gorduras) de proteínas. Detergentes tornam substâncias não solúveis ligarem-se à água. Certos detergentes (desnaturantes) rompem proteínas; detergentes não desnaturantes mantêm estrutura proteica para extração intacta.

Remoção de Proteínas

Aminoácidos na proteína ligam-se ao DNA, então usa-se enzima protease para liberar o DNA. Protease quebra proteínas afrouxando ligações entre aminoácidos. Como parte essencial da digestão, permite ao corpo usar proteínas dos alimentos. No laboratório, permite isolar DNA puro do extrato proteico.

Precipitação do DNA

Para tornar DNA isolado visível, cria-se precipitado (sólido de solução líquida). Amostra líquida submersa em mistura de etanol frio (álcool) e sal. Como DNA não mistura com álcool, forma massa branca esvoaçante na solução agitada, visível a olho nu. Sal impede DNA de permanecer dissolvido na água da amostra original.

Análise

DNA sob análise responde muitas questões. Cada um carrega "impressão digital" genética única no DNA; especialistas precisam de minúscula amostra de tecido para combinar DNA a pessoa específica. Esta técnica, perfilamento de DNA, ajuda determinar relação biológica, confirmar presença de suspeito em cena de crime ou revelar padrões migratórios da humanidade. Estudos de DNA também esclarecem doenças genéticas e curas potenciais.