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Técnicas de Isolamento em Placa por Espalhamento (Streak Plate)

Bactérias existem em populações mistas. Isolamento de colônias puras (origem clonal) é passo fundamental em microbiologia. Técnica de espalhamento em placa (streak plate) dilui progressivamente a inóculo até obter colônias isoladas.

Materiais

• Alça de inoculação (nicromo/platina ou descartável plástica)
• Placas de Petri com ágar estéril (meio sólido)
• Bico de Bunsen (esterilização da alça)

Princípio

Espalhamento serial reduz densidade celular. Colônia = aglomerado visível de células derivadas de uma única célula (pura). Colônia pura → repique para cultura pura (um só tipo bacteriano).

Procedimento Básico

1. Esterilize alça na chama; resfrie tocando ágar estéril.
2. Mergulhe na amostra; espalhe em zigue-zague no setor 1 (1/2 a 1/3 da placa).
3. Esterilize alça; resfrie; puxe bactérias do setor 1 para setor 2 (zigue-zague).
4. Repita para setores subsequentes. A amostra original inocula apenas o setor 1.

Métodos Principais

• T-streak (3 setores): topo (inóculo inicial), inferior esquerdo, inferior direito.
• Quadrantes (4 setores): quatro quadrantes iguais.
• Espalhamento contínuo: inóculo no topo, rotação 180°, espalhamento na outra metade sem re-esterilizar — maior arrasto, menos diluição.

Dica: Incubar invertido (tampa embaixo) para evitar condensação gotejar sobre ágar.