Como Preparar Lâmina de Tecido para Microscopia

O preparo de tecidos para exame microscópico fornece informações cruciais logo após a coleta da amostra. A integridade da lâmina depende de protocolo rigoroso para evitar artefatos e degradação.

Materiais Necessários

• 2 béqueres de vidro de forma baixa (250 mL)
• Nitrogênio líquido
• Gelo seco
• Molde base (tipo "peel-away")
• Matriz de tecido congelado (ex.: OCT)
• Pinças
• Solução salina fosfatada (PBS)
• Papel de limpeza de laboratório
• 2 placas de Petri

Procedimento

1. Encha um béquer com ~100 mL de nitrogênio líquido e outro com quantidade similar de gelo seco. Reserve. Adicione matriz de congelamento ao molde base e reserve.
2. Com pinças, mergulhe o espécime em PBS gelado para remover sangue residual.
3. Coloque o tecido em placa de Petri limpa e seca, mantendo-o plano. Cubra com papel de laboratório para absorver sangue remanescente; retire quando saturado.
4. Transfira o tecido ao molde com matriz, posicionando-o próximo à base e mantendo-o plano.
5. Segure a borda do molde com pinças e mergulhe apenas o fundo no nitrogênio líquido por no máximo 30 segundos.
6. Retire do nitrogênio e coloque sobre o gelo seco no segundo béquer. Armazene em freezer a -80 °C até a secção (corte em micrótomo).

Nota: O congelamento rápido em nitrogênio líquido minimiza formação de cristais de gelo que danificam a arquitetura tecidual. A matriz OCT fornece suporte durante a secção criostática.