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Tecnologia de DNA recombinante e bactérias

DNA recombinante: engenharia genética in vitro com bactérias hospedeiras

Tecnologia de DNA recombinante = meio pelo qual molécula de DNA é artificialmente engenheirada in vitro (ambiente controlado fora da célula), combinando segmentos de DNA de pelo menos duas fontes. Nova molécula contém genes/características específicas benéficas para pesquisa em saúde humana.

Aplicações

Modificação genética: introduzir gene em organismo para alterar/criar funções específicas. Ex: gene de resistência ao calor em culturas agrícolas. Também cria produtos terapêuticos: vacinas, proteínas, hormônios.

Marco histórico

Segundo IS Johnson (Science), primeiro produto comercial de saúde derivado de DNA recombinante aprovado pelo FDA: insulina "humana" biossintética. Insulina = proteína relativamente simples de copiar → candidato ideal.

Procedimento

  1. Isolar molécula de DNA desejada cortando ao redor do gene de interesse com enzimas de restrição.
  2. Inserir gene em vetor (DNA capaz de auto-propagação) → fita de DNA recombinante. Vetores: plasmídeos bacterianos ou fagos virais.
  3. Vetor introduzido em DNA especialmente preparado de célula hospedeira.

Bactérias como hospedeiras

Hospedeira mais comum: E. coli. Células captam vetor com gene desejado e inserem em seu DNA. Replicação normal → múltiplas novas fitas de DNA com novo gene.

Resultado

Célula hospedeira expressa proteínas criadas do DNA recombinante, isoláveis e purificáveis. Ex: gene da insulina inserido em bactéria → cria proteína insulina, usada como produto terapêutico.