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Protocolos XTT para Ensaio de Viabilidade Celular

Visão Geral

O Protocolo de Ensaio de Viabilidade Celular XTT oferece método seguro e simples para determinar a quantidade de células vivas, medindo em microplacas a resposta celular a fatores externos. É preferível ao Protocolo MTT por eliminar o uso de timidina (material radioativo) e fornecer resultados confiáveis e reprodutíveis.

Reação Química

O protocolo utiliza sais de tetrazólio para ensaiar proliferação, viabilidade e citotoxicidade celular. Permite determinação rápida em microplacas. A clivagem do tetrazólio a formazan resulta da reação do sistema redutor de tetrazólio nas mitocôndrias de células metabolicamente ativas.

Componentes do Protocolo XTT

Requer três componentes: Reagente XTT, Ativador XTT e Solução de Trabalho XTT. O Reagente XTT deve ser armazenado abaixo de -20°C; captura precipitação durante armazenamento e deve ser aquecido a 37°C antes do uso. O Ativador XTT também armazenado abaixo de -20°C, aquecido a 37°C até dissolução completa. A Solução de Trabalho é preparada combinando 5 mL de Reagente XTT com 100 µL de Ativador XTT.

Vantagens do Protocolo XTT

• Mais sensível que marcação radioativa de DNA com timidina.
• Elimina materiais radioativos.
• Rápido, sem necessidade de etapas de estabilização celular.
• Recomendado para ensaios de alta throughput, reduzindo perda e variação celular.