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Descrição e Funcionamento do Citômetro de Fluxo Clínico

O que é

Citômetro de fluxo = equipamento que analisa características físicas e químicas de células/partículas em suspensão, uma a uma, em alta velocidade. Usado para triagem, diagnóstico e monitoramento de doenças.

Aplicações clínicas

• Hematologia (leucemias, linfomas, imunofenotipagem).
• Banco de sangue (tipagem, triagem).
• Imunologia (subpopulações linfocitárias CD4/CD8, HIV).
• Oncologia (DNA ploidia, ciclo celular, doença residual mínima).
• Análise de DNA/RNA, citocinas, receptores, apoptose.

Princípio de funcionamento

1. Células em suspensão → fluxo laminar (hidrodinâmico) → passam uma a uma pelo feixe de laser.
2. Dispersão de luz (forward scatter = tamanho; side scatter = granularidade/complexidade interna).
3. Fluorescência: anticorpos marcados com fluorocromos ligam-se a antígenos de superfície/intracelulares.
4. Detectores convertem sinais ópticos em pulsos elétricos → canais numéricos → análise computacional.
5. Resultado: histogramas, gráficos de densidade (dot plots), contour plots.

Três sistemas principais

Sistema	Componentes / Função
Fluidics	Câmara de fluxo, injeção da amostra, transporte ao laser, foco hidrodinâmico (single cell stream).
Óptica	Lasers (405, 488, 640 nm etc.), lentes, filtros dicróicos/de banda, bancada óptica. Excitação e coleta de fluorescência/dispersão.
Eletrônica	Conversão fotão→elétron (PMT/APD), processamento de sinal, digitalização, armazenamento (FCS), análise.

Citometria de fluxo = padrão ouro para imunofenotipagem e análise multiparamétrica de célula única.