Dicas de cultura de tecidos: manipulação e soro fetal

Células em cultura

Células aderentes ou em suspensão; origem vegetal ou animal. Primárias (direto do organismo) ou linhagens (mantidas in vitro). Linhagens frequentemente são tumorais – considerar ao planejar experimentos.

Manuseio delicado

Desprendimento: raspagem (mata muitas células – só para lisados) ou tripsina/EDTA. Tripsina remove proteínas de membrana; células arredondam e levam horas (geralmente overnight) para readererir.
Minimize exposição: 1 mL tripsina para frasco 25 cm², agite 5 seg, aspire excesso. Incube durante tripsinização.
Após desprendimento, adicione meio com soro, pipete suavemente para dissociar aglomerados. Deixe pouco meio no frasco. Evite bolhas e vortex – células frágeis.

Inativação térmica do soro fetal bovino (SFB)

Antigamente, SFB continha proteínas do complemento (lisam células). Inativação a 56°C/30 min ou pré-aquecimento a 37°C inativa complemento. Hoje, filtração 0,1-0,04 µm remove micoplasmas.
Inativação térmica degrada vitaminas, aminoácidos, fatores de crescimento – pode prejudicar linhagens exigentes. Para linhagens lentas/sensíveis, considere apenas filtração esterilizante; pode aumentar robustez celular.