Descrição de uma tuberculose Gram

A tuberculose é uma doença infecciosa causada pelo Mycobacterium tuberculosis. A tuberculose é uma doença respiratória caracterizada por formações de tubérculos , necrose , abcessos , fibrose e calcificação nos pulmões . Ele também pode infectar os rins , os gânglios linfáticos, ossos , articulações e diagnóstico laboratorial skin.Primary de Mycobacterium tuberculosis envolve a coloração de visualizar as bactérias sob o microscópio . O espécime de escolha é escarro ou lavado bronco-alveolar para identificar uma infecção respiratória ou uma amostra de tecido real . Fisiologia

Mycobacterium tuberculosis é uma forma de bastonete ( bacilos ) , não-móveis , não- sporing , obrigar aeróbio . Eles medem micrômetros 0.4x3 de comprimento. Mycobacterium tuberculosis sofre fissão binária ( divisão célula reprodutiva ) a cada 15 a 24 horas, o que é lento em comparação com outras bactérias. Devido a isso , o mycobacterium pode demorar nove semanas para aparecer no meio de cultura .

Mycobacterium tuberculosis é sensível à luz ultravioleta e do calor ( por exemplo, a pasteurização ) , mas resistentes a desinfectantes químicos .

Gram Stain

Mycobacterium tuberculosis não pode realmente ser classificada como gram positivas ou gram negativa. A classificação baseia-se em gramas a quantidade de peptidoglicano da parede celular de uma bactéria . Uma bactéria gram positiva tem uma camada espessa de peptidoglicano ( cerca de 90 por cento ) , enquanto que uma bactéria gram negativa tem uma camada fina de peptidoglicano ( 5-20 por cento ) . Os corantes gram penetrar a parede celular e ligam-se com os componentes químicos na parede celular . As bactérias manchadas aparecerá roxo ou rosa sob o microscópio.

Com Mycobacterium tuberculosis , a parede celular é composta de lipídios peptidoglicano , mas também complexos, que inibem a penetração do corante grama. A parede celular também resiste a descoloração por ácido ou álcool , de modo a micobactéria são chamados de " ácido -rápido. " Os lipídios da parede celular são ácidos micólicos , fator corda e cera -D . Se a bactéria fosse manchado, as células bacterianas parecem fracamente gram- positivas ou pálido com muito pouco de cor.

Para visualizar as bactérias , colorações especiais , como a mancha Aumarine ou a mancha Zhiel - Neelson deve ser realizada.
mancha Auramine - rodamina

O processo Auramine - rodamina usa um corante amarelo fluorescente para visualizar Mycobacterium tuberculosis em um microscópio de fluorescência. O permanganato de potássio ou laranja de acridina pode ser usado como um contracorante . Sob a lente, as células bacterianas aparecerá verde.

A mancha Auramine - rodamina é mais sensível que o Zhiel - Neelson e mais rentável.
Ziehl- Neelson mancha

A mancha Ziehl- Neelson originado de cientistas Franz Ziehl e Friedrich Neelsen . Ele usa fuschin carbol aquecida, alta álcool-ácido concentração e um contrastante , como verde ou azul de metileno malaquita . Sob um microscópio de fluorescência, as células bacterianas aparecerá rosa brilhante .

O Ziehl- Neelson é o padrão ouro para a identificação primária do Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae.
Agar

secundária de microscopia identificação, Mycobacterium tuberculosis deve ser cultivada em agar cultura especial. Ágar Lowenstein -Jensen tem substâncias orgânicas complexas (por exemplo, ovo, batata ) , sais , glicerol e verde malaquita ( inibe outras bactérias ) . Os antibióticos podem ser adicionados para inibir ainda mais bactérias contaminantes . A amostra é colocada sobre esta agar , e as bactérias se desenvolvem em 3-9 semanas.

Uma solução de cultura de nutrientes , tais como albumina e biotina pode ser usado para apoiar o crescimento do mesmo a menor quantidade da bactéria alvo . Isto é conhecido como Middlebrook 7H9 (ou 7H12 ) médio.

As colônias aparecerá como pequenas, polidos , luz colônias marrons em ambos.

Com tecnologia avançada, Mycobacterium tuberculosis podem agora ser cultivadas utilizando um leitor automático . A solução líquida de Middlebrook 7H9 médio e um composto fluorescente indicador é usado para monitorar o crescimento e relatar a infecção positiva ou negativa.