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Técnicas Sorológicas para Classificação de Salmonella

Salmonella é gênero de bactérias; certas subespécies são culpadas comuns em intoxicação alimentar. Classificação é complexa, não menos porque diferentes sistemas de nomenclatura foram usados. Em geral, salmonelas classificam-se em duas espécies, subdivididas por subespécie e sorotipo (sorovar). Técnicas sorológicas desempenham papel chave na classificação.

Identificação

Anticorpos são moléculas em Y produzidas pelo sistema imune que se ligam a alvos altamente específicos. Um anticorpo típico liga-se a apenas um antígeno/alvo. Cientistas usam essa propriedade para diferenciar cepas no mesmo gênero/espécie. Métodos para sorotipar bactérias são técnicas sorológicas; vários em uso comum.

Aglutinação em Lâminas

Teste mais simples. Gota de bactéria em solução salina colocada em dois locais separados na lâmina; anticorpos para antígeno específico adicionados a apenas um. Se antígeno presente na amostra, anticorpos ligam-se; como cada anticorpo em Y liga dois antígenos simultaneamente, bactérias e anticorpos entrelaçam-se formando grumos visíveis a olho nu. Se antígeno ausente ou em quantidade mínima, nenhuma mudança visível.

Aglutinação em Tubos

Semelhante à lâmina, mas em tubo de ensaio (ou múltiplos) para determinar presença do antígeno. Anticorpos específicos para flagelos bacterianos (caudas chicote para propulsão) exibem padrão característico: bactérias fracamente aglutinadas, podem ser separadas por agitação.

ELISA

Ensaio imunoenzimático (ELISA) técnica poderosa para identificar rapidamente bactérias de amostra desconhecida por antígenos. "Double antibody sandwich assay" mais comum para Salmonella. Primeiro, anticorpos para antígeno conhecido fixados nas paredes de poços em placa de microtitulação (poços pequenos para amostras). Antígeno desconhecido adicionado, poços lavados para remover antígeno livre. Se antígeno correspondeu ao anticorpo, permanece preso. Depois, mais anticorpos adicionados; estes têm enzima (proteína que catalisa reação) ligada. Se antígeno presente e preso aos anticorpos da parede, anticorpos enzimáticos ligam-se ao antígeno. Finalmente, químico especial adicionado. Se anticorpos enzimáticos ainda lá, enzima altera químico mudando cor. Mudança de cor = antígeno correspondente presente na amostra.

Tipos

Existem >2.000 sorotipos de Salmonella. Agrupados em sorotipos usando antígenos O e H. Antígeno O: molécula parte da parede celular; antígeno H: parte do flagelo/cauda. Dois sorotipos conhecidos: typhi e typhimurium; primeiro causa febre tifoide, segundo intoxicação alimentar. Sorotipagem de Salmonella separa subtipos medicamente prejudiciais deste gênero.