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Testes para infecção fúngica: microscopia, cultura, luz de Wood e diagnóstico diferencial

Abordagem diagnóstica integrada

Diagnóstico fúngico combina métodos: clínica + microscopia direta (rápido, barato) + cultura (padrão-ouro, identifica espécie) + ferramentas complementares.

1. Exame microscópico direto (KOH / Parker / calcofluor white)

• Material: raspado de borda ativa da lesão, unha, cabelo, swab mucosa, escarro, LCR, biópsia
• KOH 10-20% (aquecer levemente) dissolve queratina → visualiza hifas, leveduras, pseudohifas
• Calcofluor white + fluorescência → maior sensibilidade
• Parker (tinta china) p/ Cryptococcus no LCR
• Resultado em minutos-horas. Não identifica espécie.

2. Cultura fúngica (Micologia)

• Meios: Sabouraud dextrose agar (pH 5,6, inibe bactérias), BHI, meio cromogênico (CHROMagar), inibidores (cicloheximida, cloranfenicol)
• Incubação: 25-30°C (dermatófitos, fungos filamentosos), 35-37°C (leveduras, dimórficos)
• Tempo: 48h (leveduras) a 4-6 semanas (dermatófitos lentos, dimórficos)
• Identificação: macro/micromorfologia, testes bioquímicos (auxanograma, assimilção), MALDI-TOF, sequenciamento ITS/D1-D2
• Antifungigrama (CLSI/EUCAST) para orientar terapia sistêmica

3. Luz de Wood (luz ultravioleta 365 nm)

• Microsporum canis, M. audouinii → fluorescência verde-maçã brilhante (cabelo infectado)
• Trichophyton schoenleinii (favus) → fluorescência azul-esverdeada opaca
• Corynebacterium minutissimum (eritrasma) → coral-vermelho
• Pseudomonas aeruginosa → azul-esverdeado
• Limitação: Trichophyton tonsurans (principal causa tinea capitis EUA/Brasil) NÃO fluoresce. Negativo não exclui.

4. Métodos moleculares e sorologia

• PCR em tempo real (painéis sindrômicos: dermatófitos, Candida, fungos dimórficos, Pneumocystis)
• Antígeno galactomanano (Aspergillus), β-D-glucano (pan-fúngico), antígeno Cryptococcus (LCR/sangue)
• Sorologia: precipitação, imunodifusão, ELISA (histoplasmose, coccidioidomicose, blastomicose, paracoccidioidomicose)

5. Histopatologia / biópsia

PAS, Grocott-Gomori (metenamina-prata), mucicarmim. Mostra invasão tecidual (hifas em tecido = invasivo vs. colonização). Essencial p/ micoses profundas, fúngicos oportunistas.