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Métodos de Coleta e Cultura de Tecidos: Biópsia, Swab, Sangue e Processamento Laboratorial

Finalidade da Cultura de Tecidos

Isolar, identificar e testar sensibilidade de microrganismos (bactérias, fungos, micobactérias, vírus) ou analisar morfologia celular/tecido para diagnóstico histopatológico.

Métodos de Coleta

1. Biópsia (Padrão-Ouro para Tecido Sólido)

• Tipos: incisional (fragmento), excisional (lesão inteira), agulha grossa (core needle), agulha fina (FNAB — citologia), percutânea guiada por imagem (US/TC), cirúrgica aberta/laparoscópica;
• Indicação: lesões suspeitas de neoplasia, granulomatoses, infecções profundas (osteomielite, abscesso de órgão sólido);
• Vantagens: arquitetura tecidual preservada, imuno-histoquímica, biologia molecular;
• Desvantagens: invasiva, dor, sangramento, infecção, custo, requer anestesia/sala cirúrgica.

2. Swab (Cotonete / Escovado) — Superfícies e Cavidades

• Uso: feridas, úlceras, mucosa oral/nasal/vaginal/uretral, olho, ouvido, cateteres;
• Técnica: rotação firme sobre superfície lesionada, evitar contaminantes adjacentes;
• Transporte: meio de transporte (Amies, Stuart, Cary-Blair) — mantém viabilidade anaeróbios/fastidiosos;
• Vantagens: minimamente invasivo, rápido, barato;
• Limitações: apenas superfície, não avalia profundidade/invasão.

3. Hemocultura (Sangue) — Bacteremia/Fungemia

• Punção venosa asséptica rigorosa (antissepsia 2% clorexidina + álcool 70%, tempo de secagem);
• Volume: 20–30 mL/adulto (2–3 frascos: aeróbio, anaeróbio, pediátrico/pediatric) — volume < 10 mL reduz sensibilidade;
• Timing: ideal antes do antibiótico; se já em uso, colher no vale (trough) ou usar frascos com resinas adsorventes;
• Incubação: 5–7 dias (sistemas automatizados: BACTEC, BacT/ALERT) — detecção de CO₂;
• Subcultura e identificação (MALDI-TOF, painéis bioquímicos, PCR).

Processamento Laboratorial Pós-Coleta

Desprendimento de Células/Tecido para Cultura Primária

• Mecânico: espátula de borracha / raspagem — baixa viabilidade, campo amplo;
• Enzimático (Proteolítico): tripsina, colagenase, dispase — remove proteínas de superfície, pode danificar receptores;
• Químico (EDTA): quelante de Ca²⁺/Mg²⁺ → descola células preservando proteínas de membrana — método de escolha para passagem/subcultura.

Condições de Crescimento (Incubadora)

• 37°C, 5–10% CO₂, umidade > 90% (evita evaporação do meio);
• Meio: DMEM/RPMI + 10% SFB (soro fetal bovino) + penicilina/estreptomicina (inicial);
• Troca de meio a cada 2–3 dias; passagem na confluência 70–80%;
• Controle de micoplasma (PCR periódico) e autenticação de linhagem (STR profiling).

Boas Práticas e Segurança

• Identificação inequívoca da amostra (nome, DOB, ID, local, data/hora, coletor);
• Formulário de solicitação clínica completo (diagnóstico presumido, antibióticos em uso, alergias);
• Transporte imediato ou refrigeração (2–8°C) se atraso > 30 min (exceto hemocultura — temperatura ambiente);
• Biossegurança: Nível 2 para maioria; Nível 3 para TB, fungos dimórficos, arbovírus.