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Técnicas de Separação Médica: Centrifugação, Cromatografia, Eletroforese e Mais

Laboratórios clínicos dependem de métodos de separ físico-químicos para isolar analitos para diagnóstico, monitoramento e pesquisa. Sete técnicas fundamentais:

1. Centrifugação

Separa partículas por densidade via força centrífuga. Uso clínico: Fração de sangue (hemácias, camada de buffy, plasma/soro), preparo de sedimento urinário, contagem de células do LCR.

2. Cromatografia

Particionamento diferencial entre fases móvel e estacionária.

• HPLC/UPLC: Monitoramento de drogas, ensaios hormonais, níveis de vitaminas.
• GC-MS: Toxicologia, rastreamento de distúrbios metabólicos (ácidos orgânicos).
• TLC/Papel: Ensino, separações qualitativas simples.

3. Eletroforese

Separa moléculas carregadas (proteínas, ácidos nucleicos) por tamanho/carga em um campo elétrico.

• Eletroforese em Gel: Frações de proteínas (variantes de hemoglobina, imunoglobulinas), análise de DNA/RNA.
• Eletroforese Capilar: Rastreamento de alta resolução de hemoglobinopatias, quantificação de proteínas.

4. Precipitação

Converte analitos solúveis em formas insolúveis via adição de reagente.

• Proteína urinária (ácido sulfossalicílico), cetona (nitroprussiato), bilirrubina (Fouchet’s).
• Bioquímica: Purificação de proteínas (sulfato de amônio).

5. Diálise

Difusão através de uma membrana semipermeável ao longo de um gradiente de concentração.

• Clínico: Hemodiálise (terapia de substituição renal).
• Laboratório: Troca de tampão, remoção de pequenas moléculas de amostras proteicas.

6. Filtração

Separação baseada em tamanho via mídia porosa.

• Esterilização (0,22 µm), clarificação de amostras, microbiologia (filtração por membrana para contagens de UFC).

7. Destilação

Separação por mudança de fase por diferenças no ponto de ebulição.

• Purificação de água para preparo de reagentes, recuperação de solventes, fabricação farmacêutica.

Cada técnica explora uma propriedade física distinta — densidade, polaridade, carga, solubilidade, tamanho, volatilidade — permitindo isolamento preciso de analitos para diagnósticos modernos.