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Técnicas de Coloração Ácido-Resistente

O objetivo da coloração ácido-resistente é separar ou diferenciar organismos ácido-resistentes de não ácido-resistentes. Esses organismos não respondem a corantes como organismos regulares, sendo difíceis de observar ao microscópio. A coloração ácido-resistente pode corar esses organismos para observação em testes médicos, como determinar níveis de certas bactérias e microrganismos em pacientes com HIV. Mycobacterium e Nocardia são dois exemplos específicos de organismos ácido-resistentes geralmente testados.

Procedimentos

A maioria das bactérias é corada com corante de Gram ou etanol para observação ao microscópio. Células ácido-resistentes, como micobactérias, resistem à coloração com corante de contraste devido ao conteúdo lipídico na parede celular. Como resultado, procedimento especial deve ser feito para corar essas células difíceis. Existem três técnicas que aplicam corante a essas bactérias ácido-resistentes, capazes de mudar o pigmento das células apesar da resistência ao corante. São: coloração de Ziehl-Neelsen, coloração de Kinyoun e coloração por fluorocromo. Esses métodos criam pigmentação mais permanente, e bactérias ácido-resistentes permanecem coradas por mais tempo que células coradas com corante tradicional.

Coloração de Ziehl-Neelsen

Distinta por usar calor para corar bactérias ácido-resistentes. É técnica de duas etapas. Amostra bacteriana é saturada com corante carbol-fucsina na primeira etapa. A lâmina com corante é então aquecida. Durante aquecimento, bactérias ácido-resistentes perdem cor e assumem a do carbol-fucsina (geralmente vermelho). Após concluído, substância de azul de metileno é aplicada. O azul não liga às bactérias ácido-resistentes devido aos lipídios na parede celular, mas liga a outros organismos na lâmina. Resultado: bactérias ácido-resistentes coradas de vermelho e outros organismos de azul. Os dois organismos agora podem ser distinguidos pela cor ao microscópio.

Método de Kinyoun

Não utiliza calor. Em vez disso, usa corante de fusão muito mais forte e concentrado. Este corante concentrado liga-se apenas a bactérias ácido-resistentes, enquanto corante de cor diferente liga-se apenas a organismos não ácido-resistentes. Novamente, duas cores resultam, permitindo distinção ao microscópio.

Coloração por Fluorocromo

Usa técnica diferente de leitura dos resultados. Dois tipos de corante são aplicados, resultando em organismos ácido-resistentes e não ácido-resistentes de cores diferentes. Porém, o corante aplicado aos organismos ácido-resistentes é fluorocromo, que é fluorescente. Microscópio fluorescente especial é usado para ler resultados, identificando o corante fluorescente que corou apenas organismos ácido-resistentes.

Quando a Coloração Ácido-Resistente é Feita?

A técnica é usada em testes para doenças causadas por micobactérias. Micobactérias causam infecções com sintomas semelhantes à tuberculose. Tipicamente, aparecem apenas em pessoas com sistema imunológico enfraquecido, como pacientes com HIV ou AIDS.