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Componentes da Coloração de Gram: Violet, Iodo, Álcool/Acetona, Contrastante

Sobre a Coloração de Gram

Desenvolvida por microbiologista holandês em 1884. Teste médico para diferenciar dois tipos de condições pulmonares. Analisa células pulmonares e identifica tipo de bactéria pela reação a componentes injetados no tecido.

4 Componentes Principais

1. Corante Violeta (Corante Primário)

Violeta de cristal, metil violeta ou violeta de Geneciana. Muda cor das células bacterianas. Não usado sozinho. Após adição, 2º componente necessário antes de observações preliminares. Sem ele, corante fixa mal.

2. Iodo (Mordente)

Adicionado simultaneamente ao corante. Iodo + violeta = complexo com fixação mais forte nas células que retêm cor. Nesta etapa, todas as células ficam roxo-acastanhadas. Pouca diferenciação entre positivo/negativo.

3. Álcool Etílico ou Acetona (Descolorante)

Após corante + iodo, adiciona-se álcool/acetona/mistura para descolorir.

• Células Gram-negativas: solução dissolve camada lipídica externa → cor lavada (só camada externa absorveu corante).
• Células Gram-positivas: mantêm cor roxo-acastanhada — solução desidrata células, fechando poros por onde corante escaparia.

4. Contrastante (Contrast Stain)

Último componente. Laboratórios usam fucsina ou safranina. Fucsina = cor mais escura, facilmente vista (preferida). Objetivo: tornar células negativas rosadas (em vez do roxo-acastanhado do violeta+iodo). Permite ao técnico ver claramente diferenças entre os dois tipos, além de tamanho e forma.

Resultado final: Gram-positivas = roxas; Gram-negativas = rosadas/vermelhas.