Fezes de humanos e outros animais de sangue quente contêm bactérias chamadas coliformes, que ocorrem naturalmente no trato digestivo, auxiliando na digestão. Embora coliformes não causem doenças, sua presença em água, solo e vegetação pode indicar outros microrganismos causadores de doenças (bactérias, vírus, parasitas). Testar presença e quantidade de coliformes determina potabilidade. Métodos: fermentação em tubos múltiplos, filtração em membrana e teste de substrato cromogênico.
Em meio de cultura com lactose, coliformes fermentam açúcar e produzem gás. Técnica: tubos de caldo inoculados com diluições seriadas da amostra (ex: 1 ml, 0,1 ml, 0,01 ml), incubados a 35 °C. Análise requer 5 tubos de pelo menos 3 diluições seriadas. Produção de gás ou crescimento visível em 48h = resultado positivo. Número de tubos positivos/negativos permite estimar coliformes. Tabela "Número Mais Provável" (NMP/MPN) calcula densidade.
Para coliformes fecais: amostra passa por filtro de membrana com poros de 0,45 µm (retém bactérias). Filtro colocado em caldo específico para coliformes fecais, incubado a 44,5 °C por 24h. Após incubação, colônias bacterianas contadas; densidade de coliformes calculada.
Emprega substâncias que mudam cor em reação química. Detecta proteínas/enzimas específicas de coliformes. Pode detectar presença/ausência e estimar números (similar à fermentação em tubos). Meios de substrato comercialmente disponíveis em tubos descartáveis, poços ou frascos para 100 ml. Meio inoculado incubado a 35 °C pelo tempo especificado pelo fabricante; examinado para mudanças de cor. Densidade determinada por tabela do fabricante.
Uso pretendido da água dita tamanho da amostra: água potável = 100 ml; água de rio = 5 ml; escoamento pluvial = 1 ml; esgoto bruto = 1 ml ou menos.