Análise Microscópica de Células Sanguíneas: Guia Completo

Uma contagem sanguínea requer mais do que apenas contar glóbulos vermelhos, brancos e plaquetas — também envolve a identificação dos tipos individuais de glóbulos brancos e a observação da morfologia dos glóbulos vermelhos e plaquetas. Embora a contagem real possa ser feita em equipamento eletrônico, a identificação e morfologia são realizadas colocando uma gota de sangue em uma lâmina de microscópio de vidro e fazendo uma esfregaço. O esfregaço é seco e corado com coloração de Wright, e examinado sob microscópio.

Materiais Necessários

• Microscópio
• Lâminas de microscópio
• Álcool isopropílico ou sabão
• Lancetas estéreis ou agulha
• Cuba de coloração com coloração de Wright
• Cuba de coloração com água destilada
• Papel toalha
• Óleo de imersão
• Livro de referência

Instruções

1. Preparação do esfregaço: Limpe a ponta do dedo indicador com álcool ou água e sabão. Faça uma pequena punção na ponta do dedo usando lanceta estéril ou agulha. Coloque uma pequena gota de sangue em uma extremidade da lâmina. Aproxime a borda de outra lâmina contra a gota em ângulo de 30 a 40 graus e arraste a gota ao longo da lâmina original para fazer um esfregaço fino ("filme"). Deixe secar.
2. Coloração: Mergulhe a lâmina com o esfregaço seco na cuba com coloração de Wright por 15 segundos. Remova o excesso e transfira para a cuba com água destilada por 30 segundos. Enxágue em água corrente para remover excesso de corante. Seque a parte inferior e bordas no papel toalha e deixe secar ao ar.
3. Preparação para microscopia: Coloque uma gota de óleo de imersão no esfregaço seco e corado. Posicione a lâmina no palco do microscópio e prenda nos clipes. Ligue a lâmpada e ajuste o condensador (para cima: mais brilho, menos contraste; para baixo: mais escuro, mais contraste) e o diafragma de íris (aberto: mais luz; fechado: menos luz). Comece com a objetiva de imersão de baixa potência (40x, 43x ou 45x).
4. Observação em baixa potência: Gire a objetiva de baixa potência e abaixe usando os botões de ajuste grosso até tocar a gota de óleo. Use o ajuste fino para focar. Observe pelo ocular e ajuste o foco apenas com o botão fino. Glóbulos vermelhos aparecem como pequenos discos bicôncavos avermelhados. Glóbulos brancos são maiores, menos numerosos, espalhados entre os vermelhos. Geralmente têm núcleo roxo grande cercado por citoplasma azul, rosa ou acinzentado. Tipos principais: neutrófilos, linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos. Plaquetas aparecem como pequenos pontos roxos espalhados.
5. Observação em alta potência: Gire cuidadosamente a objetiva de alta potência (95x, 97x ou 100x) na gota de óleo. Esta fornece maior ampliação para examinar corpos de inclusão, microorganismos e anomalias estruturais. Apenas pequenos ajustes de foco com o botão fino. Ajuste a fonte de luz se necessário — elevar o condensador e abrir o diafragma dá imagem mais brilhante.
6. Finalização: Após o exame, gire a objetiva de baixa potência para posição, remova a lâmina do palco e limpe todos os vestígios de óleo das lentes e do palco.