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Protocolos de Imunoquímica (Imuno)
Visão Geral
Existem muitos protocolos e técnicas de imunoquímica para detectar existência de proteínas em células ou tecidos. Cientistas e imunologistas usam informação proteica de protocolos imuno para identificar marcadores de doença. Através destes protocolos, frequentemente complexos, pesquisam e diagnosticam causas e fatores na progressão e erradicação de doenças.
Principais Protocolos
Protocolos de Imunofluorescência
Métodos de coloração identificam proteínas e antígenos nas células do corpo usando corante fluorescente e fluorocromo para ligar anticorpos primários e secundários.
- Imunofluorescência direta: corante fluorescente em anticorpo primário
- Imunofluorescência indireta: fluorocromo em anticorpo secundário, que reconhece anticorpo primário
- Células estudadas sob microscópio de fluorescência para visualizar presença dos anticorpos
Protocolo de Imunoeletroforese
Segundo site ImmunoHistoChemistry Protocols, necessário quando múltiplos complexos antígeno-anticorpo precisam ser resolvidos.
- Técnica separa proteínas usando campo elétrico, seguido de imunoprecipitação
- Processo separa antígenos proteicos da solução/soro em gel de ágar usando anticorpos que ligam àquela proteína
- Proteínas não reativas removidas do gel
Protocolo de Expressão Proteica Global
- Identifica proteínas e compara perfis peptídicos complexos fragmentando proteínas em peptídeos
- Fragmentação via nucleases (quebram cadeias de ácido nucleico)
- Separação de compostos: coluna de cromatografia líquida