Como Rotular protease Substrato produtos

As proteínas são um componente de todas as células do corpo. As proteases (também conhecidos como enzimas proteolíticas ou proteases ) são enzimas digestivas , cuja função é a degradação de proteínas . Além disso a digestão , as proteases são também essenciais para a coagulação do sangue , o controle metabólico e regulação imunitária . Durante o processo bioquímico ( catálise ) , os substratos se ligam ao local ativo da enzima e são transformados em um ou mais produtos que são, então, liberadas do site. Este processo pode ser aumentada ou inibida para aumentar ou reduzir as reacções do corpo , dependendo do resultado desejado . Produtos de substrato rotulagem permite aos cientistas para medir a atividade enzimática. Marcação fluorescente é uma técnica usada para colorir moléculas particulares , tornando -os mais fáceis de controlar. Coisas que você precisa
Alvo molécula fluorescente cocktail
kit rotulagem corante
Fluorescência instrumento lendo
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Como Rotular protease Substrato produtos
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Escolha o seu corante fluorescente . Tinturas comuns incluem rodamina e fluoresceína. Estes geralmente podem ser comprados a partir de fabricantes .
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Executar a reacção e remover o fluoróforo não usada a partir de moléculas -alvo , utilizando cromatografia de exclusão de tamanho ( um processo que separa as moléculas com base no seu tamanho ) . Colunas remoção de corante também são comumente usados. Estes são frequentemente anunciados com kits de rotulagem.
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Detectar as moléculas . Utilizar um instrumento de leitura de fluorescência , tal como um microscópio de fluorescência . Luz de um comprimento de onda específico é passado através da molécula (indiretamente para algumas técnicas ) , iluminando o fluoróforo .
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Tire suas medidas . Porque ensaios medem tanto quanto substrato foi consumida ou a quantidade de produto libertado ao longo de um período de tempo , as quantidades da enzima pode ser medida em moles ( quantidade física ) ou em unidades de enzima (actividade ) .