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Teste Microtox®: Ensaio de Bioluminescência Bacteriana para Triagem Rápida de Toxicidade

O teste Microtox® é um ensaio bioanalítico padronizado e rápido (5–30 min) in vitro que usa a bactéria marinha Vibrio fischeri (estirpe NRRL B-11177) para avaliar toxicidade aguda.

Princípio

• V. fischeri bioluminesce naturalmente (reação de luciferase).
• Toxicológicos inibem a atividade metabólica → a emissão de luz diminui.
• % de inibição vs. controle = medida de toxicidade.
• EC50 (concentração efetiva que causa 50% de perda de luz) é calculado.

Protocolo

1. Reconstitua bactérias liofilizadas.
2. Expõe a diluições da amostra + controle de diluente.
3. Incube a 15°C (padrão).
4. Leia luminômetro em 5, 15, 30 min.
5. O software calcula EC50, intervalos de confiança.

Aplicações

• Triagem de efluentes de água/esgoto.
• Ranking de toxicidade de produtos químicos/produtos.
• Água porosa de sedimento, lixiviados de solo.
• Eventos de contaminação de água potável.
• Controle de processo (industrial).

Vantagens

• Rápido, baixo custo, pequeno volume de amostra.
• Ampla sensibilidade (orgânico, inorgânico, metais pesados).
• Padronizado (ISO 11348, ASTM D5660).
• Instrumento portátil (Microtox® M500, FX).

Limitações

• Sistema bacteriano ≠ toxicidade mamífera/humana.
• Não identifica o tóxico específico.
• Interferências: cor, turbidez, volatilidade, pH, salinidade (ajustes necessários).
• Não para endpoints crônicos/subletais.

Uso Regulatório

Ferramenta de triagem; não um endpoint regulatório isolado. Complementa análises químicas específicas e bioensaios de nível superior (dáfnia, peixe).