As vantagens da coloração direta em esfregaço

A identificação de microrganismos desempenha papel significativo no tratamento de doenças. O exame microscópico de um esfregaço corado é geralmente o primeiro passo na detecção e identificação de bactérias causadoras de doenças. Embora o procedimento não faça uma identificação definitiva, fornece pistas importantes sobre o tamanho, forma e composição estrutural do organismo. As colorações podem ser diretas ou indiretas. Quando se usa coloração direta, ela pode ser simples ou diferencial. Apesar de suas limitações, a coloração direta tem numerosas vantagens.

Preparação do esfregaço

O primeiro passo nos procedimentos de coloração bacteriana direta é a preparação do esfregaço. Células de uma cultura ou amostra são espalhadas em uma película fina sobre uma lâmina de vidro para microscópio, secas e fixadas usando calor ou fixativo químico. A fixação prende as bactérias à lâmina e impede que sejam lavadas durante o procedimento de coloração. Os esfregaços devem ser finos o suficiente para permitir a observação de células individuais e fixados suficientemente para permitir lavagens repetidas durante a coloração.

Corantes

Devido ao seu alto teor de água, os micróbios são quase incolores. A coloração os realça e revela suas diferentes características. Corantes são geralmente sais compostos de partículas carregadas, chamadas íons. Quando misturados com água, um sal se dissocia em cátions carregados positivamente e ânions carregados negativamente. Corantes são sais nos quais os cátions ou os ânions são coloridos. Dependendo de qual tipo de íon carrega a cor, os corantes microbiológicos comuns são básicos ou ácidos. Corantes básicos contêm cátions coloridos e ânions incolores. Exemplos incluem azul de metileno, fucsina básica e violeta de cristal. Corantes ácidos têm ânions coloridos e cátions incolores. Exemplos incluem eosin, vermelho do Congo e nigrosina.

Princípio

As bactérias carregam uma leve carga negativa líquida. Consequentemente, atraem e ligam corantes básicos positivamente carregados. Como as próprias bactérias retêm o corante, o processo é um método de coloração direta. Uma coloração direta pode ser simples ou diferencial. Coloração simples usa um corante para revelar tamanho, forma e arranjo das bactérias. Uma coloração diferencial, como a coloração de Gram, usa dois corantes básicos de cores diferentes para distinguir tipos de bactérias além de suas características físicas. Técnicas de coloração indireta, ou negativa, usam corantes ácidos. As bactérias repelem o corante e permanecem incolores contra o fundo que retém a coloração.

Vantagens

A coloração direta de células bacterianas é a técnica mais comumente usada para visualizar bactérias. É barata, simples e relativamente rápida. Esta técnica fornece aos profissionais de saúde resultados no mesmo dia, uma vantagem potencialmente vital ao diagnosticar e tratar algumas infecções, como meningite bacteriana. Esfregaços corados diretamente são preparações permanentes que podem ser reexaminados posteriormente, se necessário. Como a coloração direta mata as bactérias, seu risco de infecção ao manusear o esfregaço é reduzido.