Como Executar Índice de Assimetria em Genomas

Contexto

Genoma contém toda informação biológica construir/manter organismo. Geralmente ADN (ácido desoxirribonucleico), dividido unidades discretas = genes. ADN replica faz cópia exata divisão celular. Duplicação genes transfere funções/características nova geração. Taxa duplicação pode ser assimétrica → novas funções/evolução. Assimetria taxa ocorre livremente natureza, mas pode demonstrar laboratório usando linhas celulares.

Materiais Necessários

• Linhas celulares fibroblastos humanos
• Meio manutenção
• Fonte radiação gama e UV
• Centrífuga
• Incubadora
• Salina fosfatada tamponada

Instruções

1. Incubar linhas fibroblastos meio contendo timidina, penicilina, glutamina, soro fetal bovino a 37°F (≈2,8°C) incubadora 5% CO₂. Nota: 37°F parece erro; provavelmente 37°C.
2. Expor linhas fontes luz gama/UV 30 min. Recolocar incubadora 18-24h.
3. Fazer suspensões culturas meio crescimento fresco, incubar 1-2h.
4. Método sedimentação sacarose alcalina estudar estabilidade/estrutura ADN. Diluir células 20 volumes salina fosfatada, centrifugar 1000 rpm 4 min ângulo 4°. Misturar solução hidróxido sódio/cloreto sódio, identificar fase crescimento/estrutura ADN alterações.